抗菌涂料的检测方法
1、菌种的保藏与活化
将菌种接种于培养基平面上,在37 ℃下培养24 h后,放入冰箱中保藏,作为斜面保藏菌。将斜面保藏菌转接到平板培养基上,在37 ℃下培养24 h。试验时用第3~14代内转接的新鲜细菌培养物。
2、菌悬液的制备
用接种环从转接培养基上取少量的细菌,加入50 mL磷酸缓冲溶液(PBS)中,并依次做10 倍递增稀释。按GB/T4789.2-2008中的方法进行活菌计数,选择菌液浓度为(5.0~50.0)×105 cfu /mL。
3、涂料样板制备
涂料样板的制备按GB/T 1727-1992。实验样板大小为50 mm×50 mm,涂刷好的样板实验前需在紫外灯下灭菌30 min。
4、抗菌性实验
分别取0.2 mL 实验用菌液滴加在无抗菌成分的涂料空白对照样品及抗菌涂料样品上。用无菌镊子夹起灭过菌的薄膜分别覆盖在以上样板上,铺平使菌液均匀接触样板,置于灭菌平皿中,在相对湿度大于90 %,温度37 ℃的恒温培养箱中培养24 h。将培养24 h 后的样板及覆盖膜取出,分别放入以灭过菌的烧杯中,分别加50 mL PBS 溶液,用灭过菌的镊子夹起薄膜反复冲洗样板,充分摇匀后,得到稀释度为100的菌悬液,用PBS溶液进行10倍次稀释,得到一系列菌悬液,并按GB/T 4789.2-2008规定的方法测定活菌数。
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